不同品种芒果叶中营养成分及其活性分析

徐从华,马挺军

(北京农学院 食品科学与工程学院，北京 100026)

芒果叶为漆树科植物芒果(MangiferaindicaL.)的叶，在中国主要产于云南、广西、广东、福建、台湾等地，在印度、孟加拉和马来西亚等国也有大量种植，品种较为丰富[1]。芒果叶主要含有酚酸、黄酮、甾体皂苷等成分[3]，现代药理研究表明芒果叶及其提取物具有止咳平喘[4-6]，抗氧化[7]，抗炎[8]等作用。

随着水产养殖业的发展，饲料供需矛盾日益突出，饲料原料不足，尤其是蛋白质饲料不足，已成为水产养殖业发展的极大障碍。就全世界鱼用配合饲料组成而言，其主要蛋白质饲料仍是鱼粉和大豆粕。这两种传统的蛋白质饲料不仅产量有限，而且价格高昂，因此世界各国都十分重视新蛋白质饲料的开发，以拓宽饲料来源，降低饲料成本[9]。而芒果叶的来源较为充足，其含有大量的蛋白质、脂肪、维生素和矿物质，且黄酮和酚酸都是很好的抗氧化剂，如果鱼饲料中添加了这些物质，会起到抗氧化、消炎杀菌的作用。除此之外，有研究发现饲料中添加芒果叶浸膏，提高了罗非鱼、鲤鱼和甲鱼的抗氧化能力及免疫力；
进而提高了罗非鱼成活率、鲤鱼和甲鱼的生长速度；
同时提高了饲料转化效率，降低了养殖的饲料成本[10]。而且芒果叶提取物对水产常见病原菌表现出较好的抑菌活性[11]。基于此，研究不同品种芒果叶中的活性成分含量及清除DPPH的能力，选择出品质较佳的芒果叶品种，对开发新型鱼饲料有十分重要的意义。

1.1 试验材料

原料：干燥的贵妃芒果叶、圣心芒果叶、台芒一号芒果叶、金煌芒果叶、象牙芒果叶由海南东方农场提供。用粉碎机粉碎，过60目筛，备用。

主要试剂：芦丁、没食子酸、Folin-Ciocalteu试剂(Sigma)，碳酸钠、乙醇、亚硝酸钠溶液、氯化铝溶液、氢氧化钠(北京化工厂)均为分析纯。

1.2 试验方法

1.2.1黄酮含量测定

标准溶液配制：精确称取芦丁标准品20 mg，置于100 ml容量瓶中，加60%乙醇溶解，稀释至刻度，精确量取25 ml，置于50 ml容量瓶中，稀释至刻度，摇匀，即得每1 ml含芦丁0.1 mg的标准溶液。

标准曲线制作：精确量取标准溶液0.0、2.5、5.0、7.5、10.0、12.5 ml，分别置于25 ml容量瓶中，加30%乙醇补足至12.5 ml，加5%亚硝酸钠溶液0.75 ml摇匀，放置5 min后，精确加入10%硝酸铝溶液0.75 ml摇匀，放置5 min，再精确加入1 mol/L氢氧化钠溶液10 ml，用30%乙醇稀释至刻度。以第1容量瓶为空白，于510 nm波长下测定吸光度，以吸光度为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线。

根据莫阳丽等[12]的研究方法提取芒果叶中黄酮，测定芒果叶的黄酮含量。

1.2.2酚酸的测定方法

(1)标准曲线的制作

称取0.005 0 g没食子酸标准品，定容至50 ml，配成0.1 mg/ml的标准液，分别吸取0.5、1.0、1.5、2.0、2.5 ml没食子酸标准液，定容至3 ml。配成10、20、30、40、50 μg/ml的标准液。吸取上述标准液0.4 ml于试管中，加入2 mol/L福林酚试剂0.1 ml，加入15%的碳酸钠溶液2 ml，用蒸馏水定容至8 ml。在25℃反应2 h，另吸取蒸馏水0.4 ml，同上操作。在765 nm处测定吸光度。

(2)样品测定

固体样品在料液比1:30(液为60%的乙醇)、温度为50℃，时间40 min，回流提取总酚酸。抽滤，取膏体用乙醇溶解，定容至50 ml，取0.4 ml，按照标准曲线的方法测定。

1.2.3营养成分的测定

蛋白质含量测定参照GB 5009.5—2016 《食品安全国家标准 食品中蛋白质的测定》[13]；
脂肪含量的测定方法参照GB/T 5009.6—2016《食品中脂肪的测定》[14]；
总碳水化合物的测定方法，参照GB 5009.7—2016 《食品安全国家标准 食品中还原糖的测定》[15]；
总糖含量的测定方法，参照GB 5009.8—2016 《食品安全国家标准 食品中果糖、葡萄糖、蔗糖、麦芽糖、乳糖的测定》[16]；
淀粉含量的测定方法，参照GB 5009.9—2016 《食品安全国家标准 食品中淀粉的测定》[17]；
粗纤维含量的测定方法参照GB/T 5009.10—2003 《植物类食品中粗纤维的测定》[18]。

1.2.4芒果叶清除DPPH活性的测定

DPPH溶液配制：准确称取20 mg DPPH，现用现配，用无水乙醇溶解并定容至250 ml。

分别将2 ml不同浓度的芒果叶提取物待测溶液及2 ml DPPH溶液加入同一具塞试管中，摇匀，放置30 min后，以无水乙醇为空白测定其吸光度Aj，同时测定DPPH溶液与2 ml无水乙醇混合后的吸光度Ac，以及2 ml芒果叶提取物溶液与2 ml无水乙醇混合后的吸光度Ai。按照下列公式计算清除率，清除率越大抗氧化能力越强。分光光度计波长为535 nm。

清除率=[1-(Aj-Ai)÷Ac]×100%

式中：Ai为2 mlDPPH+2 ml样品待测溶液的吸光度值；
Aj为2 ml样品待测溶液+2 ml乙醇的吸光度值；
Ac为2 mlDPPH+2 ml乙醇的吸光度值；
每个样品的测定管做三个平行。

2.1 黄酮与酚酸含量

五种芒果叶的黄酮和酚酸含量检测结果见图1。由图1可知，象牙芒果叶的黄酮含量显著高于其它芒果叶(P>0.05)，其含量为0.060 4±0.000 3 g/g，台农一号芒果叶中黄酮含量最低0.017 4±0.000 4 g/g，贵妃、圣心、金煌芒果叶中黄酮含量均为0.03～0.05 g/g；
台农一号、贵妃、象牙芒果叶的酚酸含量约为3.000 0 mg/g，圣心、金煌芒果叶中酚酸含量较低，分别为1.058 5±0.000 4 mg/g、1.152 9±0.000 4 mg/g。综上所述，基于黄酮和酚酸含量的比较，象牙芒果叶和贵妃芒果叶的品质较好。

图1 五种芒果叶中黄酮与酚酸含量

2.2 五种芒果叶中营养成分含量

五种芒果叶的营养成分检测结果见图2。

图2 五种芒果叶中营养成分含量.a～d表示显著性差异(P<0.05)。

图2(a)～(f)分别对应五种芒果叶中蛋白质、脂肪、碳水化合物、总糖、淀粉及粗纤维含量的测定结果。由图2(a)可知，金煌和圣心芒果叶中蛋白质含量显著高于其他品种(P<0.05)，分别为10.00±0.17 g/100 g和10.20±0.10 g/100 g，另外三种蛋白质含量在9.00 g/100 g左右；
由图(b)可知，圣心芒果叶中脂肪含量最高为2.80±0.17 g/100 g，象牙芒果叶中脂肪含量最低为1.20±0.17 g/100 g，台农一号与贵妃芒果叶种脂肪含量在2.60 g/100 g左右，而金煌芒果叶中的脂肪含量为2.30±0.26 g/100 g；
由图(c)可知，五种芒果叶的碳水化合物含量均在65.00 g/100 g以上，其中象牙芒果叶的碳水化合物含量最高；
由图(d)可知，台农一号、象牙和贵妃芒果叶的总糖含量显著高于圣心和金煌芒果叶的总糖含量(P< 0.05)，具体含量分别为5.80±0.10 g/100 g、5.40±0.44 g/100 g和5.10±0.17 g/100 g；
由图2(e)可知，圣心芒果叶的淀粉含量(11.10±0.26 g/100 g)显著高于其它品种的芒果叶(P<0.05)，其次为金煌芒果叶(9.70±0.35 g/100 g)，而台农一号芒果叶、象牙芒果叶和贵妃芒果叶淀粉含量没有显著性差异(P>0.05)，均在7.50 g/100 g左右；
由图2(f)可知，台农一号和贵妃芒果叶的粗纤维含量无显著性差异(P>0.05)，均在27.00 g/100 g以上，但显著高于其它三种芒果叶的粗纤维含量。

2.3 芒果叶清除DPPH活性

五种芒果叶提取物(2 mg/ml)清除自由基DPPH能力的测定结果如表1所示。从表1可知，五种芒果叶清除自由基DPPH的能力为：象牙芒果叶>贵妃芒果叶>金煌芒果叶>圣心芒果叶>台农一号芒果叶。

表1 五种芒果叶提取物(2 mg/ml)清除自由基DPPH能力的测定结果

研究表明，在鱼饲料中尤其是草食性鱼类配合饲料中使用一定量的苜蓿草粉，有益于提高鱼的生长性能、改善外观体形和体色以及产品品质，降低饲料成本。苜蓿的粗蛋白质含量高为12.3%～26.1%，一般为18.5%左右[19]；
和干苜蓿叶的营养成分作对比，五种芒果叶中蛋白质的含量均约为干苜蓿叶中蛋白质的含量的1/2。而饲料蛋白质水平过高，容易导致饲料营养失衡，降低鱼类对营养物质的消化利用效率，增加养殖污染物的排放，不仅增加了饲料成本,还易造成水体环境的污染[20-21]。比较五种芒果叶的黄酮和酚酸含量发现，象牙芒果叶和贵妃芒果叶品质较好；
基于六种营养成分含量的比较，贵妃芒果叶综合品质较好，此外，其DPPA清除率达到61.45%。综合考虑，贵妃芒果叶在所检测的芒果叶中最适合做鱼饲料辅料，不仅能节约成本，还能提供所需要的营养物质并且可以有效地防控鱼类疾病的发生和传播。

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