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兰州百合防病促生细菌筛选及其效果评价

来源:专题范文 时间:2024-02-07 12:38:02

李雪萍,张怡忻,李建军,许世洋,漆永红,荆卓琼,郭致杰*,李敏权*

(1.甘肃省农业科学院植物保护研究所,兰州 730070;
2.甘肃农业大学草业学院,兰州 730070)

兰州百合Lilium davidiivar.unicolor是甘肃省兰州市及周边地区的特色优势产业,是我国唯一的甜百合。因其球茎大、色泽白、口感鲜美而享誉国内外,具有可观的食用、医药、保健和装饰价值;
其富含蛋白质、维生素、微量元素等多种营养物质,具有清热安神、滋阴养肺、美容养颜及提高免疫力等功能[1,2]。因此,兰州百合越来越受消费者欢迎,需求量逐年增加,但种植条件较为苛刻,适宜种植的土地有限,从而导致连作重茬现象日益严重,其产量和品质大幅下降[3]。究其原因,一是植物根系分泌物的自毒作用[4],二是土壤养分失衡[5],如土壤酸性增强、速效钾流失、有机质缺乏等[6],三是土壤板结等物理因素以及枯萎病[7]。针对兰州百合连作引起的一系列土壤问题及枯萎病等尚未得到有效解决。

土壤微生物在土壤生态系统的作用显著,研究发现[8],其在促进土壤生态系统的物质循环、能量流动,以及维持土壤生态系统的稳定性和可持续性方面发挥着至关重要的作用。尤其当植物发生连作障碍时,土壤微生物群落结构和多样性发生变化,有益微生物丰度降低,有害物种及病原菌的丰度升高[9];
加之土壤养分失衡、土壤酸化、硬化及盐渍化,导致有益微生物活性进一步降低,病原菌等有害微生物大量繁殖[10]。在综合考虑生态、环境及经济效益的前提条件下,从微生态角度去解决百合连作障碍引起的问题,是一种有效的手段。

植物根际促生菌(Plant growth-promoting rhizobacteria,PGPR)在土壤微生物群落中扮演着重要的角色,其具有溶磷、固氮、解钾及产生植物生长激素和抑制病原真菌生长的能力,在促进植物生长以及协助植物抵抗胁迫条件、保持土壤肥力、改善土壤微生态环境方面发挥着不可或缺的作用[11-13],能部分取代化肥、农药和一些生长调节剂[14]。在小麦[15]、玉米[16]、青稞[17]等粮食作物及辣椒[18]、番茄[19]等经济作物均有研究和应用,但针对兰州百合的研究应用尚未发现。本研究从健康百合根际土壤中筛选能抑制百合枯萎病病原茄镰孢Fusarium solani和尖镰孢Fusarium oxysporum拮抗细菌及能溶磷、解钾及固氮的促生细菌,并初步制成菌剂,研究其防病促生效果,以期为百合生产上连作障碍的解决及病害防控提供有效途径。

1.1 供试材料

1.1.1 供试土壤 采自甘肃省兰州市榆中县马坡乡及园子乡不同生长时期的健康百合根际,低温运输至实验室。

1.1.2 供试病原真菌 兰州百合枯萎病病原茄镰孢Fusarium solani和尖镰孢Fusarium oxysporum由甘肃省农业科学院植物保护研究所生防研究室提供。

1.1.3 供试培养基 LB 培养基(Luria-Bertani培养基)[20];
PDA 培养基(Potato Dextrose Agar)[20];
Pikovaskaia’s(PKO)无机磷培养基[21];
蒙金娜有机磷培养基[21];
无氮培养基(Nitrogen free medium,NFM):CaCl2·2H2O 0.02 g,MgSO4·7H2O 0.2 g,K2HPO40.5 g,NaMoO4·2H2O 0.002 g,NaCl 0.1 g,苹果酸 5.0 g,生物素10 µg,0.5%溴百里酚蓝5 mL,琼脂15 g,蒸馏水1000 mL,pH 7.0;
钾长石培养基:蔗糖5 g,葡萄糖 5 g,(NH4)2SO40.5 g,酵母粉 0.5 g,MgSO4·7H2O 0.3 g,磷酸氢二钠 2 g,FeSO4·7H2O 0.03 g,MnSO4·7H2O 0.03 g,钾长石2 g,琼脂粉18 g,蒸馏水1000 mL,pH 7.2。

1.1.4 供试百合种球 本地市售健康兰州百合。

1.2 防病促生细菌筛选

分别制作LB、PKO、蒙金娜有机磷、NFM、钾长石平板,称取供试土壤10 g,稀释至10-5,用移液枪吸取500 μL稀释液注入各平板中,用涂布器涂布均匀,每样品每平板10个重复,置于30 ℃恒温培养箱中培养48 h后,挑取LB平板上的单菌落,采用平板划线法进行纯化后,采用平板对峙法筛选拮抗菌株,即将已活化的病原真菌(菌饼直径=0.6 cm)接种于PDA平板中央,并在四周等距离(距离培养中心2.5cm处)接种已纯化的细菌,置于25 ℃恒温培养箱中培养7 d后,测定抑菌圈大小,得到拮抗菌;
同时观察PKO无机磷平板、蒙金娜有机磷平板上的单菌落是否有溶磷圈,挑取有溶磷圈的单菌落经平板划线法纯化后,点接于相应的PKO无机磷平板、蒙金娜有机磷平板上,30 ℃培养5 d后,测定其溶磷圈直径,得到溶磷菌;
挑取NFM平板上的单菌落采用平板划线法纯化得到固氮菌;
挑取钾长石平板上的单菌落采用平板划线法纯化得到解钾菌。最后将筛选得到的各菌株分别接种于 PKO、蒙金娜、NFM、钾长石平板上,观察在PKO和蒙金娜有机磷平板上是否有溶磷圈、在NFM和钾长石平板上能否生长判断各菌株是否具有溶磷、固氮及解钾功能,以及采用平板对峙法进行拮抗功能测定,确定各菌株所具有的性能[18]。

1.3 定量测定各菌株防病促生性能

1.3.1 拮抗菌株抑菌率的测定 将1.2中有拮抗功能的菌株经LB平板活化后,接入LB培养液中(装液量:50 mL/150 mL三角瓶,下同),30 ℃、160 r/min摇床培养3 d后,将发酵液装入10 mL离心管中,10000×g离心10 min,将上清液用0.22 µm的微孔滤膜过滤,取1 mL滤液于涂布于PDA平板上,制成带毒平板,并以未涂布发酵液的PDA平板上为对照,分别接入供试病原真菌茄镰孢(FS)和尖镰孢(FO)(菌饼直径=0.6 cm),每处理3重复,于25 ℃下恒温培养5 d后,测量病原菌直径,计算生长抑制率。生长抑制率(%)=(对照平板病原菌菌落直径-带毒平板病原菌菌落直径)/(对照平板菌落直径-接入菌饼直径)×100[18]。

1.3.2 溶磷菌株溶磷量的测定 选取溶磷圈D/d>1.5的菌株,经LB平板活化后,接入LB培养液中,30 ℃、160 r/min摇床培养36~48 h后,取1 mL浓度为108CFU/mL的菌液分别接入PKO、蒙金娜有机磷培养液中,每菌株3重复,以不接菌的培养液为对照,30 ℃、150 r/min摇床培养10 d后,采用钼锑抗比色法测定磷含量[22]。

1.3.3 固氮菌株固氮量的测定 将1.2中确定有固氮功能的菌株经LB平板活化后,接种于LB培养液中,30 ℃、160 r/min摇床培养36~48 h后,取1 mL浓度为108CFU/mL的菌液接入NFM培养液中,每菌株3重复,以不接菌的培养液为对照,30 ℃、160 r/min培养7 d后,委托甘肃国信润达分析测试中心测定各培养液的氮含量[18]。

1.3.4 解钾菌株解钾量的测定 将1.2中确定有解钾功能的菌株经LB平板活化后,接种于LB培养液中,30 ℃、160 r/min摇床培养36~48 h后,取1 mL浓度为108CFU/mL的菌液接入钾长石培养液中,每菌株3重复,以不接菌的培养液为对照,30 ℃、160 r/min培养7 d后,委托甘肃国信润达分析测试中心测定各培养液中水溶性钾的含量[18]。

1.4 优良菌株的互作效应及菌剂配方筛选

选取1.3中各功能良好的菌株若干,两两采用划十字线的方法测定各菌株间是否有拮抗或抑制作用。然后将相互无拮抗作用的各菌株随机组合,每组合3次重复,按照1.3中的方法测定各复合菌液的生长抑制率、溶磷量、固氮量及解钾量,最后进行Topsis综合分析,得到最优组合及菌剂配方[18]。

1.5 优良菌株鉴定及安全性测定

采用DNA提取试剂盒(OMEGA),参照说明书按步骤提取1.4中最优组合及菌剂配方所涉及菌株的DNA,采用细菌 16S rDNA 通用引物 27F:5′-AGAGTTTGATCCTGGCTCAG-3′,1492R:5′-TACGGCT ACCTTGTTACGACTT-3′进行PCR扩增,PCR反应体系及反应程序参考李雪萍等[23]体系进行,1%琼脂糖凝胶电泳后回收目的片段,委托生工生物工程(上海)股份有限公司进行测序,最后将所获得的序列在GenBank基因库进行BLAST同源性比对,并用MEGA7.0中的UPGMA方法构建系统发育树,Bootstrap 1000重复检验其可信度。

1.6 菌剂制备及其防病促生效果测定

1.6.1 菌剂制备 将优良组合中的菌株活化后分别按5%的接种量接种于LB培养液中,在30 ℃、摇床转速160 r/min条件下,培养36~48 h,实时监测培养液中活菌浓度,当活菌浓度达到109CFU/mL时,终止培养,形成接种剂。在无菌条件下,将接种剂与菌剂载体(专利公布号:CN113583878A)按1:5的比例混合,置于30 ℃下培养7 d,形成兰州百合防病促生微生物菌剂。

1.6.2 田间小区试验评定菌剂效果 采用田间小区试验对菌剂效果进行评定,试验设在兰州市榆中县园子乡,设CK、TB1、TB2、TB3等4个处理,CK不施肥不施药;
TB1施磷酸二铵35 kg/亩,硫酸钾20 kg/亩(基肥),种球在50%多菌灵粉剂500×液中浸泡15 min;
TB2施菌剂8 kg/亩(拌种),不施农药;
TB3施菌剂8 kg/亩(拌种),磷酸二铵21 kg/亩,硫酸钾16 kg/亩(基肥),不施农药。百合种球为二级种球,平均重量16 g,株距15 cm,行距25 cm,每个小区面积50 m2(5 m×10 m),每处理4重复,坡度小于10°,随机分区,栽植时间2020年3月28日,多云。后期管理为5月15日中耕一次,7月8日中耕一次。于9月28日统计百合枯萎病发病率,计算防效,防效(%)=(对照组发病率-处理组发病率)/对照组发病率×100,并于11月28日对百合进行采挖,统计其产量,低温运输至实验室测定其品质、根际土壤养分。

1.6.3 百合品质测定 参照相关国家标准,对百合品质指标可溶性糖[24]、粗纤维[25]、粗灰分[26]、粗蛋白[27]、粗脂肪[28]、还原糖[29]含量进行测定,采用直接碘量法测定 Vc含量[30]、flavone含量的测定参照姜喜等[31]方法进行。

1.6.4 土壤养分测定 采用碱解扩散法测定碱解氮含量,碳酸氢纳法测定速效磷含量,采用乙酸铵浸提、火焰光度法测定速效钾含量[32];
采用容量法测定过氧化氢酶活性,靛酚蓝比色法测定脲酶活性,3,5-二硝基水杨酸比色法测定蔗糖酶活性,磷酸苯二钠比色法测定碱性磷酸酶活性[33];
参考吴小虎[34]、姚拓等[35]方法对土壤固氮酶基因nifH的相对丰度、好气性自生固氮菌及嫌气性自生固氮菌的含量进行测定。

2.1 防病促生细菌的筛选

共筛选得到防病促生菌株140株,其中拮抗菌81株,溶有机磷菌102株,溶无机磷菌82株,固氮菌118株,解钾菌32株。部分生防菌株抑菌圈直径如表1所示,JK7、JK9、JK4、JK3、M16的抑菌效果较好,抑菌圈直径在25 mm以上,并和其他菌株间差异显著(P<0.05)。JK7和JK9对两种病原均有较好的抑菌效果,JK3对尖镰孢(FO)的抑菌效果最明显,菌圈直径达31.64 mm,部分菌株的抑菌效果图如图1所示。

图1 部分拮抗菌株的抑菌效果Fig.1 Fungistatic effect of some antagonistic strains

表1 部分拮抗菌株的抑菌圈直径Table 1 Inhibition zone diameters of some antagonistic strains

如表2所示,O3、JK10、JK22、N11、N2等表现出较好溶有机磷(OP)能力,其溶磷圈直径均大于15 mm,与其他各溶有机磷磷菌株差异显著(P<0.05)。溶无机磷(IP)能力较好的菌株则有O1、O5、M53、M26、M14等5株菌,其溶磷圈直径均大于10 mm,与其他各溶无机磷菌株亦差异显著(P<0.05)。部分菌株溶磷效果如图2所示。

表2 部分溶有机磷(OP)、无机磷(IP)菌株的溶磷圈直径Table 2 Phosphorus cycle diameters of some organophosphorus (OP) and inorganic phosphorus (IP) strains

图2 部分菌株溶磷效果Fig.2 Phosphorus dissolving effect of some strains

2.2 防病促生细菌的性能

2.2.1 拮抗菌株的抑菌效果 如表3所示,部分拮抗菌株抑菌效果不明显,对茄镰孢(FS)有抑菌作用的菌株仅有3株,分别为JK7、M54、M16,其抑菌率均较低;
对尖镰孢(FO)抑菌效果较好的菌株有M6、N4、JK22等,其抑菌率均大于40%,与对照(CK)的差异均显著(P<0.05),M6的抑菌效果最好,抑菌率为46.15%。

表3 部分拮抗菌株的抑菌率Table 3 Inhibition rate of some antagonistic strains

2.2.2 溶磷菌株的溶磷量 如表4所示,菌株N11溶有机磷能力最强,溶有机磷量达71.73 μg/mL,其pH也最低,为5.91,与其他菌株的差异显著(P<0.05);
其次为JK21和B7,溶有机磷量分别为46.21和42.08 μg/mL,其他菌株的溶有机磷量最低为5.29 μg/mL,最高为36.45 μg/mL。各菌株溶无机磷能力均较强,最高为M40,达913.89 μg/mL,其次为JK5,溶无机磷量为741.22 μg/mL,其他各菌株的溶无机磷量在207.81 μg/mL~686.22 μg/mL之间,多数菌株间溶磷能力差异显著(P<0.05),pH也随溶无机磷量增加呈降低趋势,各菌株间pH差异不显著(P<0.05)。

表4 部分溶有机磷(OP)、无机磷(IP)溶磷量Table 4 Phosphorus solubility of some organophosphorus (OP) and inorganic phosphorus (IP) strains

2.2.3 菌株的固氮量及解钾量 菌株的固氮量及解钾量如表5所示,其中菌株JK19的固氮能力最好,固氮量达0.102 g/L,其次为M18,固氮量为0.091 g/L,其他菌株的固氮量集中在0.049~0.086 g/L,与对照的差异显著(P<0.05)。各菌株的解钾能力差异较大(P<0.05),JK16、JK4、JK18的解钾量均较高,达98 mg/L,JK14、JK19的解钾量则达96.23和96.73 mg/L,解钾能力最低为菌株N11,解钾量仅为7.97 mg/L。

表5 部分菌株的固氮量及解钾量Table 5 Nitrogen fixation and potassium release amount of some strains

2.3 优良菌株的互作效应

挑选若干优良菌株通过十字划线法两两进行拮抗试验发现,各组合菌株间无拮抗作用。测定各优良菌株组合的抑菌、溶磷、固氮及解钾能力发现,其中有5个组合BP1~BP5各项能力较优(表6),组合BP3、BP4、BP5的抑菌能力相当,均达到了70%以上;
组合BP5溶有机磷能力最强,BP2次之;
BP4溶无机磷、固氮和解钾能力均最强,BP5和BP3次之。各组合间的各项性能不一,差异较大(P<0.05),经Topsis综合分析发现,BP5综合性能最佳,统计量为0.6911,其次是BP3和BP4。

表6 优良菌株组合的功能特性Table 6 Functional characteristics of superior strain combinations

2.4 优良菌株分类地位的确定及安全性

对最优组合 BP5所涉及的 4株菌进行分子鉴定发现(图 3),JK21与耐寒短杆菌Brevibacterium frigoritolerans的遗传距离为0,1000次重复自展支持率为100,序列提交至GenBank登录号为OM722062;
JK22与蜡样芽胞杆菌Bacillus cereus的遗传距离为0,1000次重复自展支持率为100,登录号为OM722059;

图3 基于16S rDNA构建的系统发育树Fig.3 Phylogenetic tree constructed based on 16S rDNA

N11和M40与枯草芽胞杆菌Bacillus subtilis的遗传距离为0,1000次重复自展支持率亦为100,提交至GenBank登录号分别为OM722061和OM722060。因此,JK21鉴定为耐寒短杆菌,JK22鉴定为蜡样芽胞杆菌,N11和M40鉴定为枯草芽胞杆菌。

2.5 兰州百合防病促生微生物菌剂效果

2.5.1 对百合枯萎病的防效 如图4所示,3组处理较CK而言,其发病率均显著降低,但各处理间差异不显著(P<0.05),说明菌剂防效与化学药剂多菌灵处理效果相当,菌剂处理TB2的百合枯萎病发病率为9.15%,防效为68.93%,菌剂加施基肥处理TB3枯萎病的发病率为8.95%,防效为69.91%。

图4 不同处理百合枯萎病发病率Fig.4 Incidence of lily fusarium wilt under different treatments

2.5.2 对百合产量的影响 如表 7所示,纯菌剂处理组(TB2)低于药剂处理组(TB1),但其使单株百合母鳞茎鲜重较对照而言增加了2倍,为61.40 g,菌剂加基肥处理组(TB3)增加更显著,达81.20 g,为对照组的2.6倍,各处理间差异显著(P<0.05)。同样,单株总小鳞茎鲜重的3组处理(TB1、TB2、TB3)较对照(CK)均大幅提升,药剂处理(TB1)单株总小鳞茎鲜重最大,为65.00 g,纯菌剂处理组(TB2)与菌剂加基肥处理组(TB3)的单株总小鳞茎鲜重分别为54.03和60.57 g,比对照组(CK)增加40 g左右。除此之外,各处理小鳞茎数量较对照(CK)而言,显著增加2~3个(P<0.05)。与鲜重不同的是,菌剂处理(TB2)和菌剂加基肥处理(TB3)的小鳞茎数量高于药剂处理(TB1),说明菌剂处理发挥效果较药剂慢,但作用更长久,下一季百合总产量可能较药剂处理更高。

表7 不同处理的百合产量Table 7 The lily yields of different treatments

2.5.3 对百合品质的影响 如表8所示,不同处理方式对各指标的影响较大,较对照CK而言,除flavone的药剂处理(TB1)含量有所降低之外,其他处理可溶性糖、还原糖、粗蛋白、粗脂肪、Vc和flavone含量均升高,粗灰分和粗纤维的含量降低,说明菌剂处理可以使百合口感、营养价值、保健价值及药用价值等品质提升。其中,可溶性糖、粗蛋白、粗脂肪、Vc含量均呈现出菌剂加基肥处理组(TB3)>纯菌剂处理组(TB2)>药剂处理组(TB1)>对照组(CK)的趋势,粗纤维和粗灰分的含量则呈现出菌剂加基肥处理组(TB3)<纯菌剂处理组(TB2)<药剂处理组(TB1)<对照组(CK)的趋势,还原糖的含量呈现出纯菌剂处理组(TB2)>菌剂加基肥处理(TB3)>药剂处理组(TB1)>对照组(CK)的趋势,Flavone的含量则呈现出(TB3)>纯菌剂处理组(TB2)>对照组(CK)>药剂处理组(TB1)的趋势,由此可见,除还原糖为纯菌剂处理效果最好之外,其他均为菌剂加基肥处理效果最好,可溶性糖含量高达22.6 g/100 g,粗蛋白和粗脂肪含量分别为11.53和0.88 g/100 g,粗灰分和粗纤维的含量则分别低至2.85和0.72 g/100 g,Vc含量高达8.73 mg/100g,flavone含量较对照而言提高了0.1 mg/g;
除此之外,药剂处理(TB1)对flavone含量的影响不大,使其含量略有降低,但与对照(CK)差异不显著。

表8 不同处理的百合品质Table 8 The lily qualities of different treatments

2.5.4 对土壤养分的影响 如表9所示,药剂处理(TB1)、纯菌剂处理(TB2)和菌剂加基肥处理(TB3)均可以使百合根际土壤中碱解氮、速效钾和速效磷含量升高,但除碱解氮外,药剂处理(TB1)使速效钾和速效磷含量增加不显著(P>0.05),速效磷仅增加了1.03 mg/kg,加有菌剂的处理TB2和TB3的各土壤养分含量增加显著(P<0.05),如速效磷含量纯菌剂处理(TB2)达40.44 mg/kg,较对照(CK)翻一番,说明菌剂的使用有助于提升百合根际土壤养分。药剂处理(TB1)使过氧化氢酶含量升高,菌剂处理使过氧化氢酶含量降低,尤其是纯菌剂处理(TB2)使过氧化氢酶含量降低更为显著(P<0.05),至1.21 mL/g,过氧化氢酶反应的是土壤能量代谢情况,说明药剂的使用使土壤能量消耗提高,菌剂则可以降低土壤能量消耗。同样,药剂处理(TB1)使脲酶、蔗糖酶和碱性磷酸酶的含量降低,而菌剂处理TB2和TB3使脲酶、蔗糖酶和碱性磷酸酶的含量升高,说明菌剂能使百合根际土壤碳、氮、磷代谢增强,有助于土壤质量改善。除此之外,纯菌处理组(TB2)百合根际土壤中固氮基因、好氧自生固氮菌和厌氧自生固氮菌含量均显著增高(P<0.05),分别为 2.09×103、4.86×104、1.35×104CFU/g,而药剂处理(TB1)的固氮基因含量有所降低,好氧自生固氮菌增加量不高,厌氧自生固氮菌的增加不显著,说明药剂和肥料的使用均会对百合根际有益菌产生不良影响。

表9 不同处理百合根际土壤养分Table 9 Soil nutrients in lily rhizosphere under different treatments

植物根际促生细菌因具有溶磷、固氮、解钾等促进植物生长的功能在农业生产上越来越被重视,在改良土壤养分、土壤质地以及增加土壤调节能力方面发挥重要作用。而针对百合所生长特殊的地理环境及气候条件,引进菌剂作用效果不明显,加之枯萎病发生严重,使得研发百合防病促生菌剂势在必行。本研究从健康百合根际土壤中筛选了具有本土化的百合根际促生菌同时考虑其对百合枯萎病的防效,筛选得到高效溶有机磷(71.73 μg/mL)、无机磷(913.39 μg/mL)、固氮(0.091 g/L)、解钾(98 mg/L)能力的菌株,较Mahdi等[36]、撖冬荣等[37]所筛选的促生菌能力高出2~5倍,但就其拮抗能力较目前研究而言[38],处于中等水平,这可能与生境、作物种类不同有关。

百合种植环境及条件特殊,加之不同菌株的功能不同,单一菌株所制成的菌剂发挥的作用有限,而复合菌剂具有功能全、效果发挥稳定等优点。在多株菌联合施用的情况下,不同菌株间的协同作用提高了菌株在土壤中的存活几率,在防治植物病害,促进植物生长、改善土壤性质等方面相对于单菌剂均具有更大的优势。本研究将所筛选的优良菌株进行组合发现,其抑菌率、溶磷、解钾及固氮能力均大幅提升,尤其是抑菌能力几乎翻一番,说明采用优良的菌株组合效果要好于单一菌株,其互相协同机制如何还需要进一步研究。鉴定发现,最优组合所涉及的菌株为枯草芽胞杆菌、蜡样芽胞杆菌及耐寒短杆菌。研究[39,40]表明,枯草芽胞菌和蜡样芽胞杆菌是良好的防病促生菌种,与本研究结果一致;
耐寒短杆菌则在生物修复和防控病害方面作用突出[41,42],本研究则发现其具有良好溶磷能力、固氮和解钾作用,说明耐寒短杆菌的功能多样,其价值有待进一步开发。

众多研究表明[43-46],功能微生物菌剂对病害防控、作物品质提升、土壤养分调节有积极的作用。同时能达到废弃物利用[47]、生态修复及环境保护[48]的效果。如王国丽等[49]研究发现,使用功能微生物菌剂使向日葵的叶面积、株高、地上部干物质量分别提高7.52%、57.67%和46.51%;
王丽丽等[50]研究发现,施用微生物菌肥和菌剂能促进番茄植株生长,增加番茄产量,提高果实品质,但其和基肥搭配使用效果较好。本研究发现,使用微生物菌剂可以大幅降低百合枯萎病发生率,提高产量及百合品质,同时改善了土壤质量,与在其他作物上报道的效果相似,但纯菌剂处理部分指标与菌剂加基肥处理相比存在差异(P<0.05)。因此,菌剂在如何快速稳定起效方面还有待进一步加强研究。

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